Импотенция
Назад

ВИЧ диагностика методом иммуноблоттинга

Опубликовано: 26.03.2020
Время на чтение: 6 мин
0
0

Предназначения анализа иммуноблоттинга на ВИЧ?

Иммуноблоттинг на ВИЧ — сложный компонентный анализ при помощи которого выявляют антитела к вирусу иммунодефицита человека. Он является сочетанием ИФА и разделённых электрофоретическим образом белков вируса. Будучи составной частью геля они переносятся на мембрану из нитроцеллюлозы. Вся процедура проходит в несколько этапов строго в лабораторных условиях и требуют соответствующей квалификации и оборудования.

Все кто интересуются, что такое иммуноблот на ВИЧ, детально изучают и механику проведения данного исследования. В ходе анализа, на первом этапе вирус очищается, разрушается на составные части и проходит воздействие электрофорезом. А его антигены делятся в соответствии с молекулярным весом. Следом применяется метод блоттинга, используя который, антигены из геля переносят на нитроцеллюлозу или фильтр из нейлона.

На них содержатся белки, которые характерны для ВИЧ и на данном этапе они абсолютно невидимы глазу. После этого, на материал с антигенами наносится сыворотка или плазма крови. Если в них присутствуют антитела, то они связываются только со специфическими белками-агентами, которые соответствуют непосредственно им. Под воздействием сложных процедур, они визуализируются. Это и позволяет подтвердить наличие у человека заболевания.

Если иммуноблот положительный, то есть на мембране проявились следы, можно подтверждать наличие у человека ВИЧ. Диагностика одинаково эффективна на различных стадиях заболевания и позволяет выявить к каким именно антигенам вируса у пациента образовались антитела.

Коварство вируса иммунодефицита человека заключается в том, что длительное время он может абсолютно не проявляться. Тем временем, он живёт в клетках, встраивая в их ДНК свою информацию. В отличии от более простых вирусных инфекций, организм самостоятельно не может с ним справиться. Более того, лекарства которые могут убить болезнь — не изобретены. В результате своей деятельности, ВИЧ разрушает лейкоциты, снижая иммунитет и человек становится бессильным против любой, даже минимальной инфекции.

ВАЖНО! Если лечить ВИЧ при помощи поддерживающих препаратов, которые не позволяют вирусу размножаться, вести полноценную жизнь можно до глубокой старости. Поэтому, при малейших подозрениях, сдать анализ не будет лишним. В случае, если иммуноблот отрицательный — вируса в организме нет, даже если простой анализ крови говорит противоположное.

А если заболевание выявлено и пациент не принимает терапию, то он обречён. Больше 10 лет с момента заболевания, люди которые не лечатся адекватными препаратами не живут. ВИЧ нельзя вылечить при помощи народной медицины, голоданий и прочих практик. На данном этапе эволюции, человечество изобрело только лекарства, которые останавливают развитие вируса.

Особенности метода

ВИЧ диагностика методом иммуноблоттинга

Что такое иммуноблот на ВИЧ и зачем он нужен — вопрос, который задают пациенты и их родные. Их любопытство не праздное, ведь диагноз уже подтверждён или опровергнут ИФА. Анализ на иммуноферменты точные результаты показывает далеко не всегда. И каждый раз, когда он определяет наличие вируса в организме, требуется подтверждение результатов с использованием ПЦР и вестерн-блотта. Только в случае, когда и иммуноблот на ВИЧ положительный, принимается решение о назначении лечения.

Терапия подбирается в каждом случае индивидуально и она является пожизненной. Её задача — остановить болезнь, чтобы человек мог вести полноценную жизнь. При этом, носителю всегда необходимо помнить о мерах предосторожности в процессе взаимодействия с близкими людьми и в обществе.

ВИЧ-иммуноблоттинг позволяет выявить у больного вирус I-II типа. Антитела организм начинает вырабатывать уже спустя 2 недели после инфицирования. Их число стремительно увеличивается в крови и они не выводятся. Численность только растёт, если заболевание не лечить. При этом, будучи носителем, человек может совершенно не подозревать о своём ВИЧ-положительном статусе, так как вирус может абсолютно не проявлять себя несколько лет.

Особенности

Иммуноблот анализ – достоверный метод, который позволяет определить наличие антител к антигенам ВИЧ первого и второго типа. Если человек инфицирован, уже через две недели появляются антитела, которые могут обнаруживаться и намного позднее. Особенность ВИЧ в том, что количество антител быстро увеличивается и сохраняется в крови больного.

Когда назначают анализ иммуноблот на ВИЧ?

Анализ иммуноблот на ВИЧ делается исключительно после ИФА, если его результат положительный или сомнительный. Помимо этого, обязательный тест на ВИЧ сдают пациенты перед операцией, доноры, женщины во время беременности или планирующие беременность. Раз в 6 месяцев, тест рекомендуют проходить людям, которые часто меняют половых партнёров, так как они находятся в группе риска.

Предлагаем ознакомиться  Спираль от беременности. Фото, виды, стоимость, как работает, плюсы и минусы, как ставят

Заразиться ВИЧ можно половым путём и через кровь, в том числе от не стерильных медицинских или косметологических инструментов. Если подтвердится статус ВИЧ-положительный, иммуноблот положительный будет в любом случае. Поэтому, стоит обратиться к врачу при следующих симптомах:

  • Резкое снижение массы тела
  • Постоянная слабость, снижение работоспособности
  • Диарея более 3 недель
  • Лихорадка
  • Обезвоживание организма
  • Увеличенные лимфоузлы
  • Развитие туберкулёза, токсоплазмоза, пневмонии
  • Обострившийся герпес продолжительное время

ВИЧ диагностика методом иммуноблоттинга

Всё это может указывать на наличие вируса. Кровь для анализа на ВИЧ берут из вены. Сдавать его следует натощак. А за сутки не рекомендуется пить кофе и кофеиносодержащие напитки, алкоголь, испытывать чрезмерные физические нагрузки.

Анализ на ВИЧ можно сдать как в обычной поликлинике, частной поликлинике, так и специальных центрах ВИЧ. Результаты ИФА и иммуноблот выдаются в течении суток. По желанию, можно сделать и срочный анализ.

Те, кому в результате анализов поставили диагноз ВИЧ, задаются вопросом — может ли иммуноблот быть ложноположительным? Это практически исключено, но у 1% пациентов подобное случается. Это происходит в том случае, когда тест реагирует на другие антитела. И зачастую, данная ошибка происходит у людей с иными серьёзными хроническими заболеваниями.

Иммуноблот ложноположительный на ВИЧ, зачастую подразумевает иную медицинскую формулировку — неопределённого статуса. В данном случае, тест реагирует на отдельные белки, определяя их как ВИЧ. Такое случается при аутоиммунных заболеваниях, онкологии и даже во время беременности. В данном случае требуется обязательное проведение дополнительных анализов в интервале 1, 3 и 6 месяцев.

Может ли иммуноблот быть ложноположительным — да, может, но крайне редко. Обязательно требуются дополнительные исследования, которые могут подтвердить или опровергнуть заболевание. Ряд людей, у которых возникает подозрение на вирус терзают сомнения — нужно ли сдавать анализ через 4 недели, если через 12 его нужно делать повторно.

Предназначения анализа иммуноблоттинга на ВИЧ?

ВИЧ диагностика методом иммуноблоттинга

Что это такое «иммуноблот» уже выяснили, но кому назначают данное исследование? Поводом сдать анализы на вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) методом иммуноблоттинга становится положительный результат ИФА. Необходимо пройти через иммуноферментный анализ пациентам, которые будут оперироваться. Кроме этого, следует сделать анализ женщинам, планирующим беременность, а также всем, кто ведет беспорядочную половую жизнь. Назначают иммуноблоттинг пациентам с ВИЧ, если результаты ИФА вызывают сомнения.

Поводом для обращения к врачу могут стать следующие тревожные симптомы:

  • резкое похудение;
  • слабость, потеря работоспособности;
  • расстройство кишечника (диарея), которое продолжается в течение трех недель;
  • обезвоживание организма;
  • лихорадка;
  • увеличение лимфатических узлов на теле;
  • развитие кандидоза, туберкулеза, пневмонии, токсоплазмоза, обострение герпеса.

Пациенту не нужно подготавливаться перед сдачей венозной крови. За 8-10 часов до исследования нельзя принимать пищу. Не рекомендуется за сутки до сдачи крови употреблять алкогольные и кофейные напитки, заниматься тяжелыми физическими упражнениями, испытывать волнение.

Стоимость иммуноблота на ВИЧ

Стоимость иммуноблота на ВИЧ зависит от места проведения анализа. В государственных поликлиниках ИФА и иммуноблот должны проводиться бесплатно. Относительно частных клиник, то иммуноблотинг не является дешёвым анализом и цену на него устанавливает отдельно каждое медицинское учреждение. Но, данное исследование дешевле нежели ПЦР.

Процедура проводится путём забора крови из вены натощак. Место забора дезинфицируется и заклеивается пластырем. После анализа рекомендуется выпить сладкий чай или съесть энергетический батончик. Для того, чтобы получить направление на иммуноблот — необходимо обратиться к врачу-терапевту.

Как проводится исследование?

С точки зрения пациента иммуноблот никак не отличается от любого другого анализа: берется венозная кровь, исследуется и получается результат. Но если вдаться немного подробнее методику, то она очень не простая, но все же попробуем разобраться.

Предлагаем ознакомиться  Биопсия предстательной железы как делают подготовка последствия

Вначале, на заводе-производителе реактивов, берется «эталонный» вирус иммунодефицита человека. Затем при помощи специальной процедуры (электрофореза) в гелевой среде вирус разрушается до его мельчайших составляющих: белков (антигенов вируса). Затем при помощи самого блоттинга (от англ. промокания) частицы располагают на специальном материале – нитроцеллюлозе или нейлоновом фильтре, получается готовый к использованию индикатор, так называемый стрип.

Как вы, возможно, знаете если в крови человека присутствуют вирусы, то организм начинает вырабатывать против их оболочек (определенных белков) антитела, при чем для каждого вируса имеется свой индивидуальный набор белков-антигенов. Выявление антител к белкам-антигенам в крови есть основа метода иммуноблот. Ведь если антитело сталкивается с антигеном, то они непременно взаимодействуют друг с другом – «прилипают».

Так вот, антигены находятся на стрип-полоске и в случае наличия в крови исследуемого подходящих антигенов они обязательно взаимодействуют друг с другом а в этом месте, на стрип полоске, проявится индикатор – появится плоска (как тест на беременность). Причем в конкретном месте полоски, таким образом врач поймет есть ли в крови набор белков характерных для того или иного вируса.

Так, к примеру, при наличии на полоске потемнения в местах локализации белков gp160, gp120, gp41диагностируется ВИЧ, для других вирусов это будут совсем другой набор белков.

Нужно отметь, что иммуноблот позволяет точно установить наличие вируса только в том случае, если набор антител в крови является полным, то есть если белки gp160, gp120, gp41 присутствуют одновременно, то это 100% ВИЧ инфекция. А вот если хотя бы одного нет, к примеру: gp41 отсутствует, а есть только gp160, gp120, то тест расценивается как сомнительный и требует повторения.

Результаты анализа

Результаты анализа могут иметь два варианта — иммуноблот отрицательный или положительный. Первое значит, что вирус не обнаружен и человеку переживать не стоит. Второе развитие событий подтверждает наличие ВИЧ-инфекции в организме. После этого нужно пройти исследование ПЦР. Если вы сомневаетесь в правильности результатов, или ИФА показал положительный результат, а  western blot отрицательный — можно пройти повторное тестирование в другой клинике.

Существует вариант, когда результат не определён. Тест реагирует не на все белки вируса, а на отдельные. В данном случае требуется постоянное наблюдение и анализы сдают регулярно. Зачастую, статус ВИЧ-положительный, иммуноблот положительный подтверждается на всех этапах. В течении времени проявляются и остальные белки, а результат становится более явным. Если через 6 месяцев он так и не изменяется, то это значит, что вирус не обнаружен.

Иммуноблот положительный не означает, что нужно срочно начинать самолечение всеми доступными способами. Подбор лекарств и курс терапии может назначать только лечащий врач. Это связано с типом вируса, его концентрацией, стадией заболевания, общим состоянием здоровья пациента и другими нюансами.

Стоит учитывать, что иммуноблот на ВИЧ, положительный результат не покажет сразу после инфицирования. С момента возникновения риска должно пройти не менее 2 недель. Если результат не определён или даже отрицательный, требуется пройти повторную диагностику через 4-8 недель.

Частые вопросы

  1. Подготовка стрипа.Предварительно очищенный и разрушенный до составных компонентов вирус иммунодефицита (ВИЧ) подвергается электрофорезу, при этом входящие в состав ВИЧ антигены разделяются по молекулярному весу. Затем методом блоттинга (аналог выдавливания на «промокашку» избытка чернил) антигены переносят на полоску нитроцеллюлозы, которая отныне содержит невидимый пока глазом спектр антигенных полос, характерный для ВИЧ.
  2. Исследование пробы.На нитроцеллюлозную полоску наносится исследуемый материал (сыворотка, плазма крови пациента и т.п.), и если в пробе есть специфические антитела, то они связываются со строго соответствующими им (комплиментарными) антигенными полосами. В результате последующих манипуляций результат этого взаимодействия визуализируется – делается видимым.
  3. Трактовка результата.Наличие полос в на определённых участках нитроцеллюлозной пластины подтверждает присутствие в исследованной сыворотке антител к строго определённым антигенам ВИЧ.
  • Полоска А – Положительный контроль
  • Полоска В – Слабоположительный контроль
  • Полоска С – Отрицательный контроль
  • Полоска D – Положительный образец (обнаружено присутствие антител к ВИЧ-1)

Если ИФА показал наличие всех или почти всех антител к антигенам согласно данной тест-системы, это обозначает положительный анализ на ВИЧ. Если ответ после проведения второго серологического иммуноферментного анализа положительный, то необходимо провести иммуноблот. Расшифровка результатов его будет более верной.

Предлагаем ознакомиться  Лечение импотенции народными средствамиЧто она представляет виды импотенции

Когда расшифровываются анализы, то надо знать, что положительный тест на ВИЧ определяется:

  • от 60% до 65% через 28 дней после заражения;
  • в 80% – через 42 дня;
  • в 90% – через 56 дней;
  • в 95% – через 84 дня.

Если получен ответ на ВИЧ положительный, то это будет означать, что выявлены антитела к вирусу. Чтобы избежать ложноположительного ответа, надо сдать повторно анализы, желательно два раза. Если антитела к иммунодефициту выявлены при сдаче двух анализов из двух либо при сдаче 3-х анализов в 2-х из них, то считается, что результат положительный.

Антиген р 24 можно выявить в крови уже через 14 дней со дня заражения. С помощью метода иммуноферментного анализа этот антиген выявляется от 14 до 56 дней. По прошествии 60 дней его в крови уже нет. Только когда в организме формируется СПИД, происходит повторно рост этого белка р24 в крови. Поэтому тест-системы иммуноферментного анализа используются, чтобы обнаружить ВИЧ в первые дни заражения либо для того, чтобы определить, как протекает заболевание и контролировать процесс лечения.

Под сомнительным результатом иммуноферментного анализа подразумевается, что при диагностировании где-то ошиблись, как правило, что-то перепутали медицинские работники, или у человека есть признаки инфицирования, а результат отрицательный, что вызывает подозрение, человека направляют на повторную сдачу анализа.

Под ложноположительным результатом понимается результат, когда сдача анализов крови была сделана при следующих состояниях больного:

  • беременность;
  • если у человека нарушен гормональный фон;
  • при продолжительной иммунодепрессии.

Как расшифровать анализ в этом случае? Ложноположительный результат ставится, если выявляется хотя бы один белок. Из-за того, что антиген р24 очень зависит от индивидуальных вариаций, то, используя этот метод, в первый период заражения выявляется от 20% до 30% больных.

Иногда у ИФА бывают ложноположительные результаты (примерно в 1% случаев), причиной подобного результата может быть беременность, различные вирусные инфекции, а также простая случайность. После получения положительного результата необходим более точный тест – иммуноблот, по результатам которого и ставится диагноз.

Если ИФА бывает положительным или отрицательным, то иммуноблот может быть положительным, отрицательным или неопределенным. Неопределенный результат иммуноблота, т.е. наличие в иммуноблоте хотя бы одного белка к вирусу, может наблюдаться, если заражение произошло недавно и в крови еще мало антител к ВИЧ, в этом случае иммуноблот станет положительным через некоторое время.

https://www.youtube.com/watch?v=G6_RHKWWWos

Иммуноблот на ВИЧ не относится к дешевым исследованиям. В среднем, скрининговое обследование иммуноферментными методами стоит от 500 до 900 рублей. Иммуноблоттинг – это верификационное исследование, стоимость которого составляет от трех до пяти тысяч рублей. Более сложные методы стоят намного дороже. Например, за анализ полимеразной цепной реакции (ПЦР) нужно будет заплатить около 12000 рублей.

Где сделать анализ?

Где можно сдать анализ на ВИЧ? ИФА, иммуноблот исследования проводят в городских частных клиниках, результаты выдают в течение суток. Возможна и срочная диагностика. В государственных медицинских учреждениях анализы ИФА и иммуноблоттинг проводят бесплатно, согласно законодательству РФ. В обязательном порядке проверку на инфекционные заболевания проходят беременные женщины, а также пациенты, которым предстоит госпитализация или оперативное вмешательство.

Видео



Источники

Может ли иммуноблот быть ошибочным?

Может ли иммуноблот быть ошибочным — интересуются все, кому после проведения лабораторных исследований поставили диагноз ВИЧ? Это высокоточный анализ и если он показывает наличие инфекции, то этого достаточно для подтверждения диагноза. В ином случае, результат будет отрицательным или неподтверждённым.

Бывают ситуации, когда полоски указывающие на вирус слишком бледные и понять их довольно сложно. Такой результат стоит поддать сомнению и пройти исследование в другой клинике. В целом, ответ на вопрос может ли иммуноблоттинг быть ошибочным — однозначно нет. Данное исследование служит для подтверждения ИФА и если результат обоих идентичен, то заболевание подтверждается. В случае, когда ИФА положительный, а вестерн блот отрицательный — ВИЧ у человека нет.

, ,
Поделиться
Похожие записи
Комментарии:
Комментариев еще нет. Будь первым!
Имя
Укажите своё имя и фамилию
E-mail
Без СПАМа, обещаем
Текст сообщения
Adblock detector